Перекрестный способ определения группы крови с помощью стандартных эритроцитов
Определение группы крови по системе АВ0 перекрестным методом выполняется с применением приготовленных из крови человека стандартных эритроцитов ID DiaCell AB0 (A1, B, 0), предназначенных для in vitro диагностики (вне живого организма). Данные эритроциты представляют собой 5% взвесь, упакованы в 10 мл флаконы и полностью готовы к применению. Их назначение — выявление -А и -В антител.
Согласно порядку исследования, указанному в приказе Министерства здравоохранения РФ от 09.01.1998 г. № 2, определение группы крови по системе АВ0 будет считаться полным, если антигены А и В, выявленные при помощи анти-А, анти-В и анти-АВ реактивов, подтверждены анти-А и анти-В антителами, установленными с помощью стандартных эритроцитов.
Образцы тест-эритроцитов
Чтобы получить максимально достоверный результат при перекрестном методе необходимо использовать только свежезаготовленную кровь на консерванте или без него. Если же используется сыворотка, ее нужно предварительно около 10 минут центрифугировать со скоростью не менее 1500 об/мин. Данная процедура вызвана необходимостью удаления фибрина, остатки которого в веществе могут спровоцировать неправильную реакцию.
Процесс исследования
Определение группы крови по системе АВ0 должно проводиться в хорошо освещенном помещении при температуре не менее 15°С. Это обусловлено тем, что стандартные эритроциты должны быть комнатной температуры. Затем пробирка с тест-образцами очень осторожно встряхивается для придания взвеси максимальной однородности.
- Пластинку для определения группы крови необходимо промаркировать: указать ФИО пациента, чью группу крови определяют, и обозначить специфичность тест-эритроцитов.
- По одной капле стандартных эритроцитов группы А и группы В наносится под соответствующую маркировку.
- По одной капле сыворотки или плазмы исследуемой крови один к одному наносится на каждый из подготовленных тест-эритроцитов.
- Путем легкого покачивания пластины необходимо перемешать капли, постоянно наблюдая за процессом. Чаще всего агглютинация происходит в первую минуту, но оценка результата исследования происходит через 5 минут пребывания полученной смеси при комнатной температуре.
- Для подведения итога в аглютинационные капли добавляется 0,05 мл раствора хлорида натрия 0,9%.
Интерпретация результатов и определение группы крови
Результаты исследований
Стандартные эритроциты 0 используются в исследовании для подтверждения его специфичности. Конечный результат может отличаться от приведенного в таблице. Это случается, когда образец для исследования содержит аутоантитела или холодовые аллоантитела. Зачастую это итог агглютинации сыворотки с тест-эритроцитами 0. И чтобы подтвердить или опровергнуть наличие холодовых аутоантител, требуется провести аутоконтроль.
Делать его надо обязательно в случае наличия противоречия в результатах установления группы крови АВ0 при прямом и перекрестном способе. Положительный результат аутоконтроля означает присутствие холодовых аутоантител, отрицательный говорит о возможном наличии специфических антител, которые в дальнейшем необходимо идентифицировать.
Несмотря на то, что биосырье для приготовления стандартных эритроцитов ID DiaCell AB0 проходит тщательное предварительное исследование на содержание Hbs антигена, HCV и HIV, полное отсутствие инфекции гарантировать невозможно. Это означает, что работа с препаратами крови требует особого внимания и осторожности.
